凍存試劑、樣品可以室溫或37℃水浴解凍嗎?
凍存試劑或樣品的解凍，如果時(shí)間比較充裕，建議在冰浴或冰水浴上緩慢解凍。如果時(shí)間比較著急，大多數(shù)凍存的試劑或樣品是可 以在室溫或37℃水浴解凍(例如抗生素一些產(chǎn)品不建議客戶37度水浴)，但都必須特別小心，必須邊觀察、邊輕輕晃動(dòng)、邊融解。待 部分溶解后即需從水浴中取出，確保溶解過程中試劑或樣品還是接近0℃的。如果該試劑或樣品在0℃不會(huì)結(jié)凍，解凍后可以置于冰浴或冰水浴。
為了使生物樣品在一定的時(shí)間內(nèi)保持穩(wěn)定，人們按不同需求將樣品保存在4℃，-20℃，-80℃ 或溫度更低的冰箱中，或者保存在液氮中。本生本文談?wù)勆飿悠返蜏乇４嬗绕涫莾龃鏁r(shí)需要注意的一些問題。
凍存溫度的選擇
根據(jù)一般的物理化學(xué)規(guī)律，溫度越低，樣品的穩(wěn)定時(shí)間越長。在超低溫冰箱面世之前，-20℃ 冰箱是常用的低溫貯存工具之一。實(shí)踐證明，-20℃ 時(shí)組織內(nèi)的大分子仍然可以被降解。而且，0至-60℃ 是水的結(jié)晶溫度。結(jié)晶容易對(duì)細(xì)胞和組織的微觀結(jié)構(gòu)造成傷害，一般不在這一溫度范圍來保存組織和細(xì)胞。一些經(jīng)過提純的大分子可以在這一溫度范圍內(nèi)短期保存。
目前，大多數(shù)生物和醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)用-80℃ 冰箱或液氮凍存生物樣品。-80℃低于危害性較大的結(jié)晶溫度范圍，也是常用設(shè)備超低溫冰箱能達(dá)到的溫度。但在-80℃溫度下，不同的生物樣品的保存時(shí)間是不一致的。組織中的DNA可以在-80℃下可以保持?jǐn)?shù)年或更長時(shí)間。組織中的RNA在-80℃下的穩(wěn)定性隨不同組織或細(xì)胞而異，但一般不超過5年。一些組織內(nèi)的RNA在-80℃下不到一年就發(fā)生了降解。為了長期保存組織內(nèi)的RNA，可以將組織切成尺寸小于0.5cm 的小塊，沒入5-10倍體積的RNAsafety 等組織培養(yǎng)液中，置于凍存管內(nèi)，冰凍保存。RNAsafety 溶液能夠較好地維持RNA的完整性。甚至那些已知RNA酶含量較高的組織中的RNA也可以在RNAsafety 保存液中得以長期凍存。
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